酶底物法檢測儀器的操作步驟:
1、水樣稀釋
檢測實(shí)驗(yàn)所需水樣為100ml,若水樣污染嚴(yán)重可進(jìn)行稀釋(取10ml水樣加入到90ml的滅菌稀釋水中,必要時可加大稀釋度)。本實(shí)驗(yàn)取20個水樣分別進(jìn)行總大腸菌群(1-10號)和糞大腸菌群(11-20號)的檢測。
2、定性試驗(yàn)
用100ml的無菌稀釋瓶量取100ml水樣,加入專用培養(yǎng)基,搖晃至溶解,以36±1℃的溫度在培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。
3、定量試驗(yàn)
用100ml的無菌稀釋瓶量取100ml水樣,加入專用培養(yǎng)基,搖晃至溶解,將該溶液導(dǎo)入51孔(總大腸菌群)和97孔(糞大腸菌群)的定量盤內(nèi),然后將定量盤放入立科程控定量封口機(jī)封口,以36±1℃的溫度在培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。
5、結(jié)果判定
(1)定性反應(yīng)
對水樣培養(yǎng)24小時后進(jìn)行結(jié)果判定,如顏色變成黃色,則判定為陽性,表示水中含有大腸菌群,若水樣未發(fā)生顏色變化,則判定為陰性,表示水樣中不含大腸菌群。定性結(jié)果以大腸菌群檢出或未檢出作報(bào)告。
(2)定量反應(yīng)
對培養(yǎng)24小時后定量盤內(nèi)的水樣進(jìn)行結(jié)果判定,若孔穴內(nèi)的水樣有黃色反應(yīng)則表示該孔穴中含有大腸菌群,總大腸菌群對照51孔定量盤MPN表,糞大腸菌群對照97孔定量盤MPN表,結(jié)果以MPN/L報(bào)告。若所有孔穴均未產(chǎn)生黃色反應(yīng),以未檢出作報(bào)告。
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